光学显微镜是研究细胞、微小生物、材料等微观世界的重要工具之一。但由于物理因素的限制,光学显微镜所能观测的最小细节有着明显的限制,其分辨率极限一般被认为是0.2um。这是由以下几个方面共同决定的。
由于光的波长决定了它的折射率和散射性质。因此,在样品中发生散射的光束会使样品看起来模糊,从而限制了分辨率。这种现象被称为衍射。分辨率的极限值直接与光线的波长相关,光线波长越短,分辨率的极限就越低。
由于常见的可见光波长在400-700nm之间,因此光学显微镜的分辨率极限大约在0.2um左右。
透镜的质量和形状也会对分辨率产生重要影响。如果透镜没有制作好、没有完全定位或没有精确毛刺,那么它将产生图像畸变,从而影响分辨率。
透镜的调焦能力也会影响分辨率。当透镜不能调焦至最小聚焦点时,分辨率将会受到限制。
关键的参数是光的数值孔径。数值孔径越大,分辨率的极限值就越低。光的数值孔径是通过透镜大小和数值孔径来测量的,数值孔径的大小与透镜的放大率有关。
数值孔径还取决于介质。更高的折射率会使得数值孔径大于1.0。因此,使用油浸透镜可以提高数值孔径,从而提高光学显微镜的分辨率。
显微镜的照明和检测系统可以对图像质量和分辨率产生重要影响。如果光源不稳定或者不均匀,那么图像质量将下降,同时分辨率也将受到限制。
检测系统的信噪比也会影响分辨率。低信噪比将导致图像模糊,从而影响分辨率。
综上所述,光学显微镜的分辨率受到光的波长、透镜质量、数值孔径和显微镜照明与检测系统的影响。这些物理因素共同作用决定了光学显微镜的分辨率极限。