抗酸染色法a来自cid-fast 想推staini倒支否ng method 1882年由埃利希(F.Ehrlich论在想害)首创并经F.齐尔(Ziehl)改进而创造出的细菌染色法。
其中最具代表性的影为对结核菌的齐尔-尼尔森(Ziehl-Neelsen)染色法和齐尔-加贝特电刑声半成画玉都(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸复红染色后,用盐酸乙醇分色,再用美蓝进行对比染色,即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。
分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,来自就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。
齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固360百科结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红编滑般色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加构热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。
3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。
用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。
1、石炭酸复红
碱性复红酒精饱和溶液 10mL
5%石炭来自酸 90mL
2、3%盐酸酒精
360百科 浓盐酸 3mL
林反告束 95%酒精 97mL
3、吕氏美兰液
美兰酒精饱和液 30mL
氢氧化钾(1:10000) 100mL